4．取_支棉拭子在一只手手指曲面，从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2)，并随之转动采样棉拭予；按同样方法用另一支棉拭予涂擦另一只手。

　　5．剪去操作者手接触部位，将2支棉拭子投入10ral含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立 即送检。

　　2．若无菌增菌肉汤培养液试管浑浊，应根据实际情况选择血平板、中国蓝平板、双S平板、麦康凯平板或各种商用快速筛选平板进行细菌接种。

　　1．结果判定：卫生手消毒后细菌总数应≤10cfu／cm2；外科手消毒细菌总数应≤5cfu／cm2。

　　4，当怀疑医院感染暴发或流行与手的传播有关时，监测目的在于考察实际工作中医务人员手卫生状况，虽然同样在接触患者前或进行诊疗活动前采样，但医务人员不一定进行了手卫生。

　　4．其中一个平板置于(25±1)℃温箱培养7日，观察霉菌生长情况；另一个平板置于(36 ±1)℃温箱培养72h，记数菌落数，必要时做致病菌(金葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等)的检测。

　　2、暖箱和蓝光箱应当每日大晚班湿式清洁恒温罩内外表面，特殊感染患儿(包括多重耐药菌)还应消毒，一人用后一消毒。同一患儿长期连续使用暖箱和蓝光箱时，应当每周消毒一次，用后终末消毒。

　　4、清洁消毒后备用的暖箱应放在辅助区，注明清洁消毒日期、失效日期、清洁消毒人员姓名及检查人员姓名。推荐有效期为2周，2周内使用，可仅擦拭恒温罩内外表面。

　　1、先拔掉暖箱电源，推至清洁消毒间(辅助区)，湿式擦拭电线后将电线、先放掉水箱内残水后再清洗、浸泡消毒。

　　[1] 中华人民共和国卫生部．新生儿病室建设与管理指南(试行)[S]．2010 [2] 中华人民共和国卫生部．消毒技术规范【S]．2002．

　　1、新生儿室相对独立，婴儿有单独的床位。每张床位占地面积不少于3平方米，床间距不少 于1米。

　　4、医护人员在进行诊治过程中应当实施标准预防，并严格执行手卫生规范和无菌操作技术。接触患儿前后洗手或手消毒。接触血液、体液、分泌物、排泄物等操作时应当戴手套，操作结束后应当立即脱掉手套并洗手。

　　[1] 中华人民共和国卫生部．新生儿病室建设与管理指南(试行)[s]．2010 [2] 中华人民共和国卫生部．消毒技术规范[S]．2002． 洗手、卫生手消毒标准操作规程（SOP）

　　3、根据年龄、性别、尿道情况选择合适的导尿管口径、类型。通常成年男性选16F，女性选14F；

　　1、消毒2次：用0.5％的碘伏棉球消毒尿道口及其周围皮肤粘膜，每只棉球限用一次，程序如 下：

　　3、如要留取尿标本，可从集尿袋采集，但此标本不得用于普通细菌和线、导尿管不慎脱落或导尿管密闭系统被破坏，应更换导尿管。

　　胡必杰，郭燕红，高光明，等.医院感染预防与控制[M].上海：上海科学技术出版社，2010：6—7

　　医院获得性肺炎(HAP)，是我国最常见的医院感染类型，呼吸机相关肺炎(VAP)是其中的重要类型，预后较差。

　　(2)对气管插管或切开患者，吸痰时应严格执行无菌操作。吸痰前、后，医务人员必须遵循手卫生规则。

　　(3)呼吸机螺纹管使用一次性，有明显污染物时则及时更换；每周更换万向延长管；湿化罐添加灭菌注射用水，每天更换；螺纹管冷凝水使用500g/L做菌消毒剂处理后倾倒污水池，不可直接倾倒在室内地面，不可使冷凝水流向患者气道。

　　(5)正确进行呼吸机及相关配件的消毒：湿化罐用500mg／[。含氯消毒剂浸泡消毒，流动水冲洗、晾干密闭保存。

　　(8)对于人工道/机械通气患者，每天评估是否可以撤机和拔管，减少插管天数。（9）加强营养，检测血脂。

　　[2]胡必杰，郭燕红，高光明，等．医院感染预防与控制[M]．上海：上海科学技术出版社，2010：3

　　四、正文： 定义：微生物限度检查法：系指非规定灭菌制剂及其原辅料受到微生物污染程度的一种检查方法，包括染菌量及控制菌的检查。2 实验用具：

　　电热恒温培养箱、电热恒温水温箱、试管、刻度吸管、量筒、三角瓶、培养皿、试管架、注射器、针头、注射器盒、研钵、75%酒精棉球、紫外灯（365nm 波长）。3 培养基：

　　3.2 培养基的管理、配制应符合检定菌、培养基管理规程、培养基配制规程。试液：甲基红试液、a-奈酚乙醇试液、40%氢氧化钾溶液、靛基质试液。稀释剂：0.9%无菌氯化钠溶液。供试品溶液的制备：取供试品（供试品如为固体，置研钵中研磨成细粉）放入试管中，加入适量的稀释剂制成1：10 浓度的供试品溶液。对照用菌液：控制菌检查均应作相应已知菌的对照试验，对照菌株为大肠杆菌[CMCC（B）441022]。取相应菌株的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物1 白金耳，接种至营养肉汤培养基内，培养18-20 小时，稀释至1：106，对照菌的加入量为50-100 个。8 检查法：

　　8.1 除另有规定外，细菌的培养温度为30-35℃，霉菌的培养温度为25-28℃，控制菌的培养温度为35±1℃。8.2 细菌、霉菌计数：

　　8.2.1平皿菌落计数法取均匀供试液，进一步稀释成1：102、1：103 等适宜的稀释级。分别取连续10 倍稀释的供试液各1ml，置直径约90mm 的平皿中，再注入约45℃的培养基约15ml，混匀，等凝固后，倒置培养，每个稀释级应作2~3 个平皿。

　　营养琼脂培养基用于细菌计数，玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌计数。8.2.2 菌数测定阴性对照试验取供试验用的稀释剂各1ml，置4 个无菌平皿中，分别按细菌、霉菌计数用的培养基制备平板，培养，检查，不得长菌。

　　8.2.3 细菌培养时间为48 小时，分别在24 小时及48 小时点计菌落数，一般以48 小时菌落数为准，霉菌培养时间为72 小时，分别在48 小时及72 小时点计菌落数，一般以72 小时菌落数为准。菌落如蔓延生长成片，不宜计数。

　　8.2.5 菌数报告规则：细菌宜选取平均菌落数在30-300 之间的稀释级，霉菌宜选取平均菌落数在30-100 之间的稀释级，作为报告菌数计算的依据。如只有1 个稀释级菌落数在30-300（30-100）

　　之间时，将该稀释级的菌落数乘以稀释倍数报告，如同时有两个稀释级在30-300（30-100）之间时，按下式计算两级比值。比值=低稀释级平均菌落数稀释倍数

　　.当比值≤2 时，以两稀释级的均值报告，当比值＞2 时以低稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告，如同时有3 个稀释级的平均菌落数均在30-300（30-100）之间时，以后两个稀释级计算级间比值，如各稀释级的平均菌落数均不在30-300（30-100）之间，以最接近30 或300 的稀释级平均菌数乘以稀释倍数报告，如各稀释级平均菌落数均在300（100）以上，按最高稀释级菌落数乘以稀释倍数报告，如各稀释级平均菌落数均小于30 时，一般按最低稀释级的菌落数乘以稀释倍数报告，如当1：10（1： 100）稀释级平均菌落数等于或大于原液（或1：10）时，应以培养基稀释法测定，按测定结果报告菌数。8.2.6 培养基稀释法：取供试液（原液或1：10 供试液）3 份，每份各1ml，分别注入5 个平皿内（每皿各0.2ml）每个平皿中倾注营养琼脂培养基约15ml，混匀，凝固后倒置培养，计数，每1ml 注入的5 个平板点计的菌落数之和即为每1ml 的菌落数，共得3 组数据，以3 份供试液菌落数的平均值乘以稀释倍数报告。

　　8.3 控制菌检查除另有规定外，取供试液10ml（相当于供试品1g、1ml、cm2），直接或处理后接种，经增菌、分离培养后，进行革兰氏染色、生化试验等项检查。8.3.1 大肠菌群：

　　① 以无菌操作，将检样25g（ml）放于含有225ml 灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠），经充分振摇或研磨做成1：10 的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好在均质器中以8000—10000r/min 的速度处理1min，作成1：10 的均匀稀释液。

　　② 用1ml 灭菌吸管吸取1：10 稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml 灭菌生理盐水的试管内（注意吸管尖不要接触管内稀释液），混合均匀，做成1：100 的稀释液。

　　③ 另取1ml 灭菌吸管，按上述操作顺序，做10 倍递增稀释液。如此每次递增稀释一次，即换用一支1ml 灭菌吸管。

　　④ 根据食品卫生标准要求或标本污染情况的估计，选择3 个合适的稀释度，每个稀释度接种三管。8.3.1.2 乳糖发酵试验

　　将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1ml 以上者，用双料乳糖胆盐发酵管，1ml 及1ml 以下者，用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种三管，置36±1℃温箱内，培养24±2h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。8.3.1.3 分离培养

　　将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，置36±1℃温箱内，培养18~24h，然后取出，观察菌落形态，并做革兰氏染色和证实试验。

　　在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落1~2 个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置36±1℃温箱内，培养24±2h，观察产气情况。凡乳糖管产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。

　　8.3.1.5 报告：根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN 检索表，报告每100ml（g）大肠菌群的MPN 值。9 结果判断：

　　9.1 细菌菌落数、霉菌菌落数、控制菌三项均符合该品种微生物限度项下的规定，应判为供试品符合规定；其中任何一项不符合该品种项下规定，应判供试品不符合规定。

　　9.2 细菌菌落数、霉菌菌落数第一次测定超过该品种项下微生物限度规定时，应从同一批号样品中随机抽样，复试两次，以三次结果平均值报告。

　　9.3 如营养琼脂培养基平板上生长霉菌菌落数或玫瑰红钠琼脂培养基平板上生长细菌菌落数超过该品种项下微生物限度规定时，经复试2 次，如3 次结果平均值仍超过规定，应判为供试品不符合规定。9.4 各类制剂检出控制菌或其他致病菌时，按第一次检出结果为准，不再抽样复试，即应判该供试品不符合规定。

　　1．储血室空气培养在每月20号左右，均应在紫外线mm平板培养皿，打开培养皿盖子，放在储血室中间15分钟，盖上 盖子，并填写好检验单，送细菌室培养。

　　独立包装（瓶装、桶装、袋装）的自制医疗用水，一旦打开，使用时间不得超过24h。首次使用者应标注打开日期和时间，医院应定期对各类自制医疗用水进行监测。

　　用一次性无菌注射器抽取自制医疗用水50ml至灭菌采样瓶中，盖紧瓶口；或者出水口放水约100ml后，直接用灭菌采样瓶接水50ml。

　　1.采样人员操作时首先做好手部卫生，戴口罩、帽子等个人防护装备。2.送检时间不得超过6h，若样品保存于4℃，则不得超过24h。

　　用无菌吸管吸取1ml滴于普通营养琼脂倾注培养，平行双份，37℃培养48h后计 算菌落总数。普通营养琼脂培养基的配制按照GB/T 4789.28—2003，培养和菌落计数方法按照GB/T 7918.2—1987。

　　1.口腔科漱口水根据其工艺处理方法，建议参照GB 19298—2003，菌落总数≤ 50cfu/ml。

　　3.透析液按照《血液透析器复用操作规范》（2005版）要。